注:所有步驟應(yīng)在無菌無毒的超凈工作臺(tái)進(jìn)行。胰蛋白酶處理時(shí)間不宜過長(zhǎng)。
細(xì)菌污染是實(shí)驗(yàn)室細(xì)胞培養(yǎng)中常見的污染,即使在細(xì)胞培養(yǎng)液中加入了抗菌素,也可能因?yàn)椴僮鞑簧鞫鹞廴?。最常見的有革蘭氏陽性菌,如枯草桿菌以及大腸桿菌、假單胞菌等革蘭氏陰性菌,其中又以白色葡萄球菌較常見。
標(biāo)準(zhǔn)品指用于生物檢定、抗生素或生物藥品中含量或效價(jià)測(cè)定的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì),以效價(jià)單位(U)表示。
將動(dòng)物機(jī)體的各種組織從機(jī)體中取出,經(jīng)各種酶(常用胰蛋白酶)、螯合劑(常用EDTA)或機(jī)械方法處理,分散成單細(xì)胞,置合適的培養(yǎng)基中培養(yǎng),使細(xì)胞得以生存、生長(zhǎng)和繁殖,這一過程稱原代培養(yǎng)。
蛋白酶抑制劑與蛋白酶一樣,都是紛繁復(fù)雜的,通常使用許多化學(xué)物質(zhì)作為蛋白酶抑制劑,如 PMSF 和 leupeptin 。而且由于一種蛋白酶抑制劑只對(duì)某一類蛋白酶起作用,因此通常建議復(fù)合使用蛋白酶抑制劑