質(zhì)粒DNA的提取是從事基因工程工作中的一項基本實驗技術(shù),但提取方法有很多種,以下介紹一種最常用的方法:堿裂解法:此方法適用于小量質(zhì)粒DNA的提取,提取的質(zhì)粒DNA可直接用于酶切、PCR擴增、銀染序列分析。
科研實驗中,細胞的體外培養(yǎng)一直是一個重要環(huán)節(jié)。細胞要養(yǎng)好,就要用好血清,如MBC?有適合各種細胞培養(yǎng)的血清,尤其適合難養(yǎng)細胞,如:干細胞、肝細胞,神經(jīng)細胞,原代培養(yǎng)、細胞融合、轉(zhuǎn)染細胞等。
pH測量通常有比色法(pH試紙或比色皿)和電極法二種。比色法當然不要標定,而電極法就一定要標定,因為電極法pH測量就是將未知溶液與已知pHs值的標準溶液在測量電池中作用比較測定,這是電極法pH測量的“操作定義”所決定的。
PCR擴增DNA的原理是:先將含有所需擴增分析序列的靶DNA雙鏈經(jīng)熱變性處理解開為兩個寡聚核苷酸單鏈,然后加入一對根據(jù)已知DNA序列由人工合成的與所擴增的DNA兩端鄰近序列互補的寡聚核苷酸片段作為引物,即左右引物。此引物范圍就在包括所欲擴增的DNA片段,一般需20-30個堿基對,過少則難保持與DNA單鏈的結(jié)合。引物與互補DNA結(jié)合后,以靶DNA單鏈為模板,經(jīng)反鏈雜交復性(退火),在Taq DNA聚合酶的作用下以4種三磷酸脫氧核苷(dNTP)為原料按5'到3'方向?qū)⒁镅由?、自動合成新的DNA鏈、使DNA重新復制成雙鏈。然后又開始第二次循環(huán)擴增。引物在反應中不僅起引導作用,而且起著特異性的限制擴增DNA片段范圍大小的作用。新合成的DNA鏈含有引物的互補序列,并又可作為下一輪聚合反應的模板。如此重復上述DNA模板加熱變性雙鏈解開—引物退火復性—在DNA聚合酶作用下的引物延伸的循環(huán)過程,使每次循環(huán)延伸的模板又增加1倍,亦即擴增DNA產(chǎn)物增加1倍,經(jīng)反復循環(huán),使靶DNA片段指數(shù)性擴增。
標準物質(zhì)RM(reference material)是具有準確量值的測量標準,是具有一種或多種足夠均勻并已確定特性值的,用于校準設備、評價測量方法或給材料賦值的材料或物質(zhì)。應用于化學測量、生物測量、工程測量、無力測量等領(lǐng)域。
纖維蛋白:是人類發(fā)現(xiàn)最早的一種凝血因子,呈伸長的橢球體,是由三對多肽鏈(一對α鏈、一對β鏈、一對γ鏈)以二硫鍵連接而成的二聚物,在肝臟中合成后進入血漿,以溶解形式存在。